Tinción simple


El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tan pequeño que resultan difíciles de ver al microscopio óptico. El principal problema lo encontramos en la falta de contraste entre la célula y el medio que  le rodea, y la manera más sencilla de aumentar el contraste entre las bacterias y su medio es el uso de colorantes.

Se considera tinción simple al teñido de los microorganismos empleando solo un colorante. De manera que, las bacterias absorberán el colorante y quedarán teñidas de un solo color. El azul de metileno y el cristal violeta son dos colorantes muy frecuentes en la tinción simple.


Para realizar una tinción simple seguimos los siguientes pasos:
1. Extensión: colocamos una gota de agua el portaobjetos y extendimos sobre ella la muestra de las cepas seleccionadas utilizando un asa de siembra. 
2. Frotis: realizamos la extensión de la muestra con ayuda de un cubreobjetos. 
3. Fijación: pasamos el portaobjetos varias veces por encima de una llama, evidentemente sin permitir que llegue a hervir, hasta que se secara. 


4. Teñir con azul de metileno o cristal violeta: aplicamos el colorante a la muestra durante unos minutos. 
5. Lavar suavemente con agua. 
6. Secar y colocar un cubreobjetos. 
7. Observar al microscopio óptico. 

En el siguiente vídeo quedan recogidos todos los pasos y una fotografía al microscopio de cada muestra.


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